Гост р 54950-2012. корма для животных. определение содержания витамина а методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

12 Контроль качества результатов измерений

12.1 Контроль правильности результатов анализа

12.1.1 Контроль правильности проводят выборочным сравнением результатов спектрального анализа проб с результатами химического анализа, выполняемого по стандартизованным или аттестованным методикам. Норматив контроля K_х-с представлен в приложении , таблица .

12.1.2 При невозможности выполнения пункта в полном объеме методами химического анализа допускается выполнять контроль правильности измерений по результатам воспроизведения аттестованных значений массовой доли элементов в ГСО или СОП. Норматив контроля К_тпредставлен в приложении , таблица .

12.1.3 Число результатов при контроле правильности должно быть не менее 0,3 % общего числа определений за контролируемый период.

12.1.4 Правильность измерений считают удовлетворительной, если число расхождений результатов, превышающих допускаемое значение K_х-с или К_т,составляет не более 5 % числа проконтролированных результатов.

12.2 Контроль внутрилабораторной прецизионности результатов измерений

12.2.1 С целью контроля внутрилабораторной прецизионности результатов измерений выполняют определения массовой доли элементов в проанализированных ранее пробах, изменяя влияющие факторы (разное время, разные операторы и т. д.).

12.2.2 Число повторных измерений должно быть не менее 0,3 % общего числа измерений за контролируемый период.

12.2.3 Внутрилабораторную прецизионность результатов измерений считают удовлетворительной, если число расхождений результатов первичного и повторного анализов, превышающих допускаемое значение R_л,приведенное в приложении , таблица , составляет не более 5 % числа проконтролированных результатов.

12.3 При соблюдении условий разделов и характеристика погрешности (расширенная неопределенность) результата измерений не превысит значения D(U), приведенного в приложение , таблица .

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины с соответствующими определениями по ГОСТ Р ИСО 5725-1, ГОСТ 8.563, МИ 1317 [], РМГ 61 [], РМГ 29 [], РМГ 91 [], Р 50.2.056-2007 [], а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 методика измерений (МВИ): Совокупность операций и правил, выполнение которых обеспечивает получение результатов измерений с установленными характеристиками погрешности (неопределенности).

3.2 интенсивность спектральных линий: Мощность, излучаемая единицей объема источника в интервале длин волн, соответствующем полной ширине данной спектральной линии.

3.3 стандартный образец материала (вещества): Материал (вещество), одно или несколько свойств которого установлены метрологически обоснованными процедурами, к которому приложен документ, выданный уполномоченным органом, содержащий значения этих свойств с указанием характеристик погрешностей (неопределенностей) и утверждение о прослеживаемости.

3.4 государственный стандартный образец: Стандартный образец материала (вещества), признанный федеральным органом исполнительной власти Российской Федерации, осуществляющим функции в сфере технического регулирования и метрологии.

3.5 стандартный образец предприятия: Стандартный образец материала (вещества), признанный руководством предприятия.

3.6 аналитический сигнал: Сигнал, содержащий количественную информацию о величине, функционально связанной с содержанием элемента и регистрируемой в ходе анализа материала.

3.7 градуировочная характеристика: Функциональная зависимость аналитического сигнала от содержания элемента, выраженная в виде формулы, графика или таблицы.

3.8 характеристика погрешности результатов анализа: Граница интервала, в котором погрешность измерений находится с доверительной вероятностью 0,95.

3.9 показатель точности результатов анализа: Значения характеристики погрешности (неопределенности), установленные для любого результата анализа, полученного при соблюдении требований и правил данной методики при ее реализации в конкретной лаборатории (соответствует расширенной неопределенности с коэффициентом охвата 2).

3.10 неопределенность измерений: Параметр, связанный с результатом измерений и характеризующий рассеяние значений, которые можно приписать измеряемой величине.

3.11 стандартная неопределенность: Неопределенность результатов измерений, выраженная в виде стандартного отклонения.

3.12 расширенная неопределенность: Величина, определяемая интервалом вокруг математического ожидания результатов измерений, охватывающим большую долю распределения значений, которые обоснованно могут быть приписаны измеряемой величине.

3.13 прецизионность: Степень близости друг к другу независимых результатов измерений, полученных в конкретных регламентированных условиях.

3.14 повторяемость (сходимость): Прецизионность в условиях, при которых результаты измерений получены одним методом, с использованием одного оборудования, на одной поверхности пробы, в одной лаборатории, одним и тем же оператором и практически одновременно.

3.15 внутрилабораторная прецизионность: Прецизионность в условиях, при которых результаты измерений получают при вариации всех факторов, формирующих разброс результатов при применении методики в конкретной лаборатории.

3.16 воспроизводимость: Прецизионность в условиях, при которых результаты измерений получены одним методом на идентичных объектах испытаний в различных лабораториях.

3.17 предел повторяемости (сходимости): Допускаемое для принятой вероятности Р = 0,95 расхождение между наибольшим и наименьшим из результатов двух единичных измерений, полученных в условиях повторяемости.

3.18 критический диапазон: Допускаемое для принятой вероятности Р = 0,95 расхождение между результатами п единичных измерений, полученных в условиях повторяемости.

3.19 предел внутрилабораторной прецизионности: Допускаемое для принятой вероятности Р = 0,95 расхождение между двумя результатами измерений, полученными в условиях внутрилабораторной прецизионности.

3.20 предел воспроизводимости: Допускаемое для принятой вероятности Р = 0,95 расхождение между двумя результатами анализа, полученными в условиях воспроизводимости.

3.21 норматив контроля: Числовое значение, являющееся критерием для признания контролируемого показателя качества результатов измерения соответствующим (или не соответствующим) установленным требованиям.

6.1 Подготовка лабораторной посуды и реактивов

6.1.1 Мойку и сушку посуды проводят в отдельном помещении, оборудованном
приточно-вытяжной вентиляцией. Не допускается проведение подготовки посуды в
данном помещении для других анализов. Для сушки лабораторной посуды и
подготовки реактивов необходимо использовать отдельные сушильные шкафы.

6.1.2 Стеклянную посуду подвергают стандартной процедуре
очистки лабораторной посуды с последующей промывкой органическим растворителем
ацетоном (дважды).

6.1.3 Процедуру промывки ацетоном следует проводить в
вытяжном шкафу. Рекомендуется на стадиях промывки использовать ультразвуковую
баню. Окончательную сушку посуды проводят в сушильном шкафу, установленном в
вытяжном шкафу, при температуре от 105 °С до 110 °С.

6.1.4 Каждую новую партию реактивов проверяют на отсутствие
контаминации анализируемыми соединениями путем проведения холостого опыта в
соответствии с процедурой анализа.

7.3 Очистка подготовленных проб методом твердофазной экстракции

Картриджи для твердофазной экстракции кондиционируют на
вакуумном устройстве для твердофазной экстракции, пропуская последовательно: 2
см3 ацетонитрила и 2 см3 деионизированной воды. Затем
через картридж пропускают анализируемую пробу, полученную в соответствии с (на всех этапах
твердофазной экстракции, кроме этапов сушки, вакуум или избыточное давление не
применяют). Промывают картридж 2 см3 деионизированной воды, затем
сушат картридж 10 мин. Далее элюируют аналиты 2 см3 ацетонитрила.
Элюат упаривают на нагревательном модуле в токе воздуха до 0,1 см3
при температуре 40 °С.

12.2 Контроль правильности результатов измерений

При соблюдении требований настоящего стандарта рекомендуется
в ходе анализа каждой серии образцов проводить анализ с известным содержанием
анализов с использованием стандартной процедуры подготовки проб ().

Результаты измерений признают
удовлетворительными при выполнении следующего неравенства:

где  —
среднеарифметическое значение содержания i-го
аналита в анализируемом образце с известным содержанием i-го
анализа, мкг/кг;

X_ia — установленное значение содержания i-го
аналита по паспорту на стандартный образец, с известным содержанием i-го анализа, мкг/кг;

V_i — значение относительной расширенной неопределенности
содержания i-го аналита для соответствующего
диапазона измерений (таблицы и ), %.

13
Требования безопасности

13.1 Используемые в работе реактивы относятся к веществам
1-го и 2-го классов опасности по ГОСТ
12.1.007, при работе с ними необходимо соблюдать требования безопасности,
установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися
веществами по ГОСТ
12.1.005.

13.2 Помещения, в которых проводят анализ и подготовку проб,
должны быть оборудованы приточно-вытяжной вентиляцией.

13.3 Операции по приготовлению градуировочных растворов
следует проводить под тягой в вытяжном шкафу.

13.4 При проведении испытаний следует соблюдать требования ГОСТ
12.2.085 и правила устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих
под давлением [].

13.5 При выполнении измерений на хромато-масс-спектрометре
следует соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ
Р 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.

13.6 К выполнению измерений методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием допускаются
лица, владеющие техникой ВЭЖХ-МС/МС и изучившие инструкции по эксплуатации
используемой аппаратуры.

Приложение А
(обязательное)
Контроль стабильности результатов измерений

Периодичность контроля стабильности результатов измерений
регламентируют в руководстве по качеству лаборатории.

Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории
при реализации метода настоящего стандарта осуществляют по ГОСТ
Р ИСО 5725-6, используя контроль стабильности среднеквадратического
(стандартного) отклонения промежуточной прецизионности рутинного анализа с
изменяющимися факторами «время» и «оператор».

Применяя метод контрольных карт Шухарта, проверяют
стабильность этих результатов измерений и оценивают стандартное отклонение
промежуточной прецизионности с изменяющимися факторами «время» и «оператор».
После отбора анализируемой пробы ее подготавливают в лаборатории для анализа.
Одну пробу, подвергавшуюся анализу во время смены (С₁,),
анализирует повторно другой оператор в другую смену (С₂), и
результаты сравнивают. Значение стандартного отклонения промежуточной
прецизионности (σ_I(T,O))
устанавливают в лаборатории по результатам измерений за предыдущий период.
Параметры контрольной карты пределов для каждого диапазона рассчитывают
следующим образом:

— среднюю линию по формуле

где σ_I(T,
O) —
среднеквадратическое отклонение промежуточной прецизионности, %;

— верхний предел действия по
формуле

— верхний предел предупреждения по формуле

Расхождение (w) рассчитывают
по формуле

Расхождение w наносят на карту в течение контролируемого периода.

Рекомендуется устанавливать
контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений
было от 20 до 30. После этого проводят оценку стандартного отклонения
промежуточной прецизионности (S_{I(T, O)})
результатов по формуле

где m_n — число измерений.

Полученное значение S_{I(T, O)}
используют для последующего контроля стабильности результатов измерений.

Библиография

ПБ
03-576-2003 Правила устройства и безопасной эксплуатации сосудов,
работающих под давлением (Утверждены Постановлением Госгортехнадзора России от
11.06.2003 № 91)

Ключевые
слова: пищевые продукты, продовольственное сырье, сульфаниламиды,
нитроимидазолы, пенициллины, амфениколы, метод определения содержания,
высокоэффективная жидкостная хроматография с масс-спектрометрическим
детектированием, условия выполнения измерений, средства измерений,
вспомогательное оборудование, посуда, материалы и реактивы, подготовка к
проведению измерений, отбор и подготовка проб, порядок выполнения измерений,
обработка результатов измерений, метрологические характеристики, оформление
результатов измерений, контроль качества результатов измерений, требования
безопасности

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ Р 8.563-2009 Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений

ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ Р 52361-2005 Контроль объекта аналитический. Термины и определения

ГОСТ Р 52781-2007 Круги шлифовальные и заточные. Технические условия

ГОСТ 8.315-97 Государственная система обеспечения единства измерений. Стандартные образцы состава и свойств веществ и материалов. Основные положения

ГОСТ 12.0.004-90 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.019-2009 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 859-2001 Медь. Марки

ГОСТ 6456-82 Шкурка шлифовальная бумажная. Технические условия

ГОСТ 7565-81 (ИСО 377-2-89) Чугун, сталь и сплавы. Метод отбора проб для определения химического состава

ГОСТ 10157-79 Аргон газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 21963-2002 Круги отрезные. Технические условия

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

6.2 Приготовление растворов

6.2.1 Приготовление растворов
элюентов

6.2.1.1 Для приготовления раствора элюента мобильной фазы А
в мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят 1000 см3
деионизированной воды.

Срок хранения раствора при 4 °С — не более 1 мес.

6.2.1.2 Для приготовления раствора элюента мобильной фазы Б
в мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят 1000 см3
метанола.

Срок хранения раствора при 4 °С — не более 1 мес.

6.2.3 Приготовление раствора метанола

Для приготовления раствора метанола в мерной колбе
вместимостью 1000 см3 смешивают 500 см3 деионизированной
воды и 500 см3 метанола. Колбу помещают на ультразвуковую баню на 5
мин.

Срок хранения раствора при температуре от 0 °С до 8 °С — не
более 3 мес.

6.2.4 Приготовление градуировочных растворов

6.2.4.1 Приготовление градуировочных растворов С

Для приготовления градуировочных растворов на аналитических
лабораторных весах с пределом абсолютной допускаемой погрешности ± 0,01 мг
взвешивают по 2 мг каждого стандартного образца и переносят в отдельные мерные
пробирки вместимостью 15 см3. Добавляют 8 см3 метанола,
помещают в ультразвуковую баню на одну мин, доводят полученный раствор до метки
10 см3 раствором метанола (см. ).

Массовая концентрация каждого аналита в растворе С
составляет 200 мкг/см3.

Срок хранения растворов при температуре от 0 °С до 8 °С — не
более 3 мес.

6.2.4.2 Приготовление градуировочных растворов С₁

Для приготовления градуировочных растворов С₁
переносят по 0,05 см3 каждого раствора C
в мерные пробирки вместимостью 15 см3, доводят до метки метанолом и
тщательно перемешивают.

Массовая концентрация каждого аналита в растворе С₁
составляет 1 мкг/см3.

Срок хранения растворов при температуре от 0 °С до 8 °С — не
более 3 мес.

6.2.4.3 Приготовление градуировочных растворов D (внутренних стандартов анализируемых
соединений)

Для приготовления градуировочных растворов D на аналитических весах с пределом
абсолютной допускаемой погрешности ± 0,01 мг взвешивают по 2 мг чистого
вещества стандартного образца и переносят в отдельные мерные пробирки
вместимостью 15 см3. Добавляют 8 см3 метанола (пенициллин
G-Д₇ растворяют в 8 см3
деионизированной воды), перемешивают и помещают в ультразвуковую баню на одну
мин, доводят полученный раствор до метки 10 см3 метанолом.

Массовая концентрация каждого аналита в растворе D составляет 200 мкг/см3.

Срок хранения растворов при температуре от 0 °С до 8 °С — не
более 3 мес.

6.2.4.4 Приготовление градуировочных
растворов D₁ (внутренних стандартов
анализируемых соединений)

Для приготовления градуировочных растворов D₁ переносят по 0,02 см3 каждого
раствора D в мерные пробирки
вместимостью 15 см3, доводят до метки 10 см3деионизированной
водой и перемешивают.

Массовая концентрация каждого аналита в растворе D₁ составляет 400 нг/см3.

Срок хранения растворов при температуре от 0 °С до 8 °С — не
более 3 мес.

6.2.4.5 Приготовление градуировочных
растворов С₂

Для приготовления градуировочного раствора С₂
к сухому остатку после упаривания «чистой» пробы, полученной в соответствии с
условиями подготовки проб (раздел ),
переносят по 0,1 см3 растворов С₁ и D₁ и доводят до метки 1 см3
деионизированной водой.

Массовая концентрация аналита в растворе С₂
составляет 100 нг/см3. Массовая концентрация внутреннего стандарта в
растворе С₂ составляет 40 нг/см3.

Срок хранения растворов при температуре от 0 °С до 8 °С — не
более 3 мес.

6.2.4.6 Приготовление градуировочных растворов С₃

Для приготовления градуировочного раствора С₃
к сухому остатку после упаривания «чистой» пробы, полученной в соответствии с
условиями подготовки проб (раздел ),
переносят 0,01 см3 раствора С₁ и 0,1 см3
раствора D₁ и доводят до метки 1 см3
деионизированной водой.

Массовая концентрация аналита в растворе С₃
составляет 10 нг/см3. Массовая концентрация внутреннего стандарта в
растворе С₃ составляет 40 нг/см3.

Срок хранения растворов при температуре от 0 °С до 8 °С — не
более 3 мес.

6.2.4.7 Приготовление градуировочных
растворов С₄

Для приготовления градуировочного раствора С₄
к сухому остатку после упаривания «чистой» пробы, полученной в соответствии с
условиями подготовки проб (раздел ),
переносят 0,001 см3 раствора С₁ и 0,1 см3
раствора D₁ и доводят до метки 1 см3
деионизированной водой.

Массовая концентрация аналита в растворе С₄
составляет 1 нг/см3. Массовая концентрация внутреннего стандарта в
растворе С₄ составляет 40 нг/см3.

Срок хранения растворов при температуре от 0 °С до 8 °С — не
более 3 мес.